测定原理

      液压聚焦法 （DC检测）

      RBC检测器通过液压聚焦法 （DC检测）计数RBC和PLT。同时，血细胞比容(HCT)通过RBC脉冲高度检测法计算。在该检测器内，样本喷嘴将被定位在小孔的前面且与中心对齐。稀释后的样本由样本喷嘴被推入锥形室以后，在前鞘流内的试剂包裹下通过小孔的中心。

       通过小孔以后，经过稀释的样本被送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流，并防止产生假性血小板脉冲。

液压聚焦法改善了血细胞计数的精确度和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔，所以也可防止产生异常血细胞脉冲。

        使用半导体激光器的流式细胞计数法

使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。该计数法只需很少的样本就可对这些细胞和粒子进行检测。

       一个血样经过抽吸和测量并被稀释至指定的稀释比后，再进行染色。然后该样本将被送入贯流分析池中。

这种液压聚焦单元改进了细胞计数的精确度和重现性。同时，由于血细胞颗粒是排成一行通过贯流分析池的中心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少对贯流分析池的污染。

        半导体激光束 （波长： 633 nm）通过贯流分析池照射到血细胞上。前向散色光和侧向散色光将被光电二极管接收，侧向荧光则由APD光电二极管接收。光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。

        前向散射光和侧向散射光

        当障碍物经过光通路时，光束就在每个障碍物的不同方向上产生出散射光。这种现象称为光散射。通过检测散射光，可以得到有关细胞体积大小和材质的信息。

         同样地，当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。散射光的强度取决于诸如颗粒直径和观察角度等因素。本单元对前向散射光进行检测，提供有关血液细胞体积大小的信息；同时对侧向散射光进行检测，提供有关细胞内部 （如细胞核的体积大小）的信息。

     侧向荧光

     当光照射到经过荧光染色的血液细胞等的荧光材料上时，就会产生比入射光波长更长的光。随着染色浓度的增加，荧光强度也随之增长。通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色程度的信息。荧光向所有方向散射，本仪器检测侧向发出的荧光。

      SLS-血红蛋白法

      在过去，用于自动测量血红蛋白的主流办法是：氰化高铁血红蛋白法和氧合血红蛋白法。但是，当将这些方法用于像本仪器这样的大型全自动检测仪时，它们既有优点又有缺点。

氰化高铁血红蛋白检测法是1966年由国际血液学标准委员会 （ICSH）作为一种国际标准方法而提出的。但是由于该方法的血红蛋白转化速度较慢，并且以多样本处理为前提，该方法实际上不适用于自动检测。而且，由于该方法使用了有毒性的试剂氰化物，所以必须对废液进行处理，从而从环保的角度来讲，该方法并不受推崇。

       目前，特别是对于排出大量废液的大型全自动检测仪而言，这不是一种合适的检测方法。

相反，氧合血红蛋白检测法的血红蛋白转化速度很快，因为血红蛋白很容易转化为氧合血红蛋白。同时，由于该方法不使用诸如氰化物这样的毒性物质，所以该方法适用于自动检测。然而，该方法却不能将高铁血红蛋白转化为氧合血红蛋白。对于正常人体血液，该方法没有问题。但是对于含有大量高铁血红蛋白的样本 （如质控品样本） ，就会导致测量值低于真实值。

        SLS-血红蛋白检测法是一种利用了上述两种方法优点的检测方法。

与氧合血红蛋白检测方法一样，SLS-血红蛋白检测法的血红蛋白转换速度很快，而且该方法不使用毒性物质，这使该方法成为自动检测的一个合适的方法。

同时，由于该方法可以用于检测高铁血红蛋白，所以该方法也可以准确的检测含有高铁血红蛋白的血液 （如质控品） 。

 测定项目与通道

       WBC测定

       WNR通道

       WNR通道主要是用于计数白细胞和有核红细胞的通道。

通过使用半导体激光的流式细胞计数法，可描画出二维的散点图，X轴表示侧向荧光强度（SFL），Y轴表示前向散射光强度（FSC）。

       此散点图显示有核红细胞、嗜碱基球、嗜碱基球以外的白细胞及碎片 （溶血的红细胞和血小板等）的各组。

         WDF通道

         WDF通道主要是为分类白细胞的通道。

通过使用半导体激光的流式细胞计数法，可描画出二维的散点图，X轴表示侧向散射光强度（SSC），Y轴表示侧向荧光强度（SFL）。

        此散点图显示淋巴球、单球、嗜酸球、嗜碱基球+嗜中球以及碎片的各组。

         WPC通道

         WPC通道是用于检测骨髓芽球等未成熟细胞及淋巴球系的异常细胞的通道。

通过使用半导体激光的流式细胞计数法，可描画出二维的散点图，X轴表示侧向散射光强度（SSC），Y轴表示侧向荧光强度 SFL）。

        此散点图显示未成熟细胞、异常细胞及成熟白细胞的各组。

         RBC/阻抗法检测的PLT数测定

         RBC粒度分布

RBC （红细胞计数）是在一个低界标（LD）和高界标（UD）之间计算得出的细胞计数，这两个界标分别自动设置在25 - 75 fL和200 - 250 fL之间。

        对颗粒大小分布情况的检查将有助于了解异常情况，其中包括在不同界标水平上的异常相对频率、两个或多个峰值的存在以及异常的分布宽度。

        本仪器根据如下所示的两种方法来表达红细胞分布宽度 （RDW）。

RDW-SD

        假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为RDW-SD。使用的单位为飞升（fL）（1 fL = 10-15L）。

        RDW-CV

        点L1和L2在总分布区域中的出现频率为68.26%，使用下列方程计算RDW-CV：

          PLT粒度分析

          PLT （血小板计数）是在一个低界标 （LD）和高界标 （UD）之间计算得出的细胞计数，这两个界标分别自动设置在2 - 6 fL和12 - 30 fL之间。

对PLT颗粒大小分布情况的检查将有助于了解导常情况，其中包括低界标上的相对频率、异常分布宽度以及多个峰值的存在。

         PDW （计算的血小板分布幅度）

假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为PDW。使用的单位为飞升（fL）（1 fL = 10-15L）。

         l  P-LCR （大型血小板比率）

         P-LCR为由12 fL界标或更大界标得到的巨型血小板的比值。计算时，将固定界标与高界标之间的颗粒数，同低界标与高界标之间的颗粒数相比而得到一个比值。

         MPV （平均血小板体积）

         使用下列计算式计算MPV：

         PCT：PCT称为血小板血细胞比容或血小板容积比，并根据PLT频率进行加权。

由于表现的方法不同，所得到粒度分布的印象会差别很大。由于粒度分布的宽度会由于所使用的表现方法不同而完全不同，所以需要特别予以注意。

        本仪器使用一个常规的粒度分布表现（通常表现）和另外一种粒度分布表现法（粒度正常范围表现），使用该方法可使用户根据粒度分布直观地得到大量信息。

        通常表现

        将粒度分布的峰值设置为全尺度（显示粒度分布时的最大高度），该表示方法将分布情况以规范的形式表示出来。

 特长：可在同一尺度上观察具有不同计数值的粒度分布形式。粒度分布的宽度可进行直观对比。

 支持的显示领域：RBC和阻抗法检测的PLT数。

        粒度正常范围表现

        此表现方法不是将粒度分布的峰值作为全尺度（显示粒度分布时的最大高度）。而是将经验求得的粒度正常范围的峰值作为全尺度，该表示方法将分布情况以规范的形式表示出来。同时，此方法叠加粒度分布的正常范围。

但是，如果粒度分布的峰值比粒度正常范围的峰值要高，就将粒度分布的峰值作为全尺度来表现。在这种情况下，粒度正常         范围就根据粒度分布峰值的高度成比例减小。

       将大量健康人的粒度分布叠加起来，然后利用第10个百分位到第90个百分位之间的区域，就可以得出粒度正常范围。

特长：可从粒度分布图上直观地看出颗粒数的大小。如果粒度分布偏离正常范围，可以立即知道粒度分布形式出现了异常。

 支持的显示领域：如果将设置值预置为正常范围，则可以支持显示RBC和PLT的粒度分布。

         PLT-F通道*

         PLT-F通道用于正确计数血小板，特别是低值的血小板数。

通过使用半导体激光的流式细胞计数法，可描画出二维的散点图，X轴表示侧向荧光强度（SFL），Y轴表示前向散射光强度（FSC）。

         此散点图显示血小板、一部分红细胞、一部分白细胞及碎片的各组。

        RET测定

        RET通道*

        通过使用半导体激光的流式细胞计数法，可描画出二维的散点图，X轴表示侧向荧光强度（SFL），Y轴表示前向散射光强度（FSC） 。

        此散点图显示网状红细胞、成熟红细胞和血小板各组。

根据荧光的强度，将散点图划分为三个RET区，并计算各区中网织红细胞与网织红细胞总数的比率。

      网状红细胞比率:

       网状红细胞数:

        低荧光比率：

LFR = 100 - HFR - MFR

中荧光比率：

       高荧光比率：

         未成熟网状红细胞指数:

         IRF = MFR + HFR

         LFR——低荧光比率

         MFR——中荧光比率

         HFR——高荧光比率

         IRF——未成熟网状红细胞指数

         RET-He（网织红细胞血红蛋白含量）是由Sysmex开发出的独特项目,它使用网状红细胞散射光信号和专有的Sysmex专用的运算法则。

                                                                                                                                                      ——摘自XN系列操作手册